Tahap 1. Pembuatan Medium PDA
Bahan bahan yang diperlukan
- Kentang : 200 gram
- Dekstrosa : 20 gram
- Agar powder : 20 gram
- Air akuades : 1 liter
- Kapas dan alumunium foil secukupnya
Alat-alat
- cawan petri/botol kecil/tabung reaksi
- Autoclave atau panci presto
- Kompor
Proses pembuatan
-
- Setelah dikupas, kentang selanjutnya di potong-potong dengan ukuran ±1 cm3. kemudian di cuci bersih.
- Siapkan cawan petri / tabung reaksi atau bisa juga digunakan botol-botol kecil yang berbentuk pipih. Cuci botol tersebut hingga bersih. Akan lebih baik apabila botol tersebut disterilkan dengan cara merebusnya ke dalam air mendidih.
- Kentang yang telah dicuci selanjutnya direbus dengan air sebanyak 1 liter selama 15-20 menit.
- Setelah selesai, pisahkan kentang hasil rebusan tersebut. Kemudian saring airnya hingga bersih. Apabila volume air kentang tersebut berkurang tambahkan air lagi hingga menjadi 1 liter larutan PDA.
- Larutan PDA (1 liter) kemudian dipanaskan kembali sambil menambahkan dektrosa dan agar-agar secara perlahan hingga terlarut sempurna/mengental.
- Setelah terlarut dengan baik, tuangkan larutan PDA tersebut ke dalam botol sebanyak 1/4 volume botol.
- tutup botol tersebut dengan menggunakan kapas dan alumunium foil.
- Botol yang telah diisi media PDA selanjutnya disterilisasi menggunakan autoclave atau panci presto selama 30-45 menit.
- untuk hasil yang lebih baik, lakukan sterilisasi sebanyak 2 kali selama 2 hari berturut turut.
- Setelah selesai (sterilisasi hari ke 2), keluarkan botol tersebut dan letakkan dalam posisi miring. Tujuannya untuk memperluas area dari media PDA sehingga pertumbuhan miselium jamur akan lebih banyak. Usahakan kemiringan hingga media PDA mendekati leher botol tapi tidak sampai menyentuh kapas pada tutup botol. Sentuhan media PDA dengan kapas dapat menyebabkan kontaminasi.
Untuk meyakinkan apakah media PDA ini terkontaminasi atau tidak biarkan selama beberapa hari kemudian perhatikan apabila terdapat titik titik hitam, hijau atau coklat atau putih berlendir maka besar kemungkinan media telah terkontaminasi. Sebaliknya, apabila media terlihat bersih maka media PDA siap untuk digunakan dan diinokulasi dengan kultur / eksplan jamur.
Recent Comments